肠球菌的耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究

目的研究临床分离的肠球菌对常用抗生素的耐药性及肠球菌与感染性疾病的关系。方法应用纸片扩散法检测从临床标本中分离的３１１株肠球菌的耐药性；脉冲场凝胶电泳（ＰＦＧＥ）对细菌分型；病例回顾性分析。结果肠球菌对临床常用的１５种抗生素的耐药率以万古霉素最低；其次为氨苄西林／舒巴坦耐药率为１７．４％；亚胺硫霉素耐药率为１８．３％。粪肠球菌与屎肠球菌对抗生素的耐药率有明显差异。应用ＰＦＧＥ法将粪肠球菌分为Ａ型及亚型、Ｂ型、Ｃ型及亚型、Ｄ型，屎肠球菌分为Ａ、Ｂ、Ｃ型。结论肠球菌对临床常用的１５种抗生素的敏感性以万古霉素最敏感。肠球菌引起的不同系统感染，以泌尿系统最常见。ＰＦＧＥ对肠球菌感染流行监测是一个有力的工具。     

2014-2017年某医院152例尿路感染肠球菌耐药性监测分析

目的:了解2014年1月-2017年1月某医院尿液标本分离肠球菌的临床特点及耐药情况,为肠球菌经验治疗提供参考依据。方法:回顾性分析2014年1月-2017年1月分离自尿液标本肠球菌,VITEK2-compact微生物鉴定系统对细菌进行鉴定,纸片扩散法联合MIC法行抗生素敏感试验,WHONET 5.6和SPSS 20软件进行统计分析。结果:(1)2014年1月-2017年1月尿液标本共检出病原菌908株,主要是大肠埃希菌,其中屎肠球菌84株,粪肠球菌68株,是位于第2位和第3位的病原菌。(2)屎肠球菌对于氨苄西林、高水平庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因的耐药率分别89.6%,63.2%,91.5%,85.7%,69.4%、明显高于粪肠球菌的24.2%(2=65.001,P=0.000)、40.4%(2=8.246,P=0.004)、56.6%(2=26.129,P=0.000)、51.2%(2=21.144,P=0.000)、12.2%(2=50.193,P=0.000);粪肠球菌对于氯霉素的耐药率为33.3%,显著高于屎肠球菌2.6%(2=27.035,P=0.000)。二者对于喹诺酮类抗生素都有较高的耐药率(51.2%)。(3)检出一株对万古霉素耐药的屎肠球菌,耐药率为1.2%(1/84);未检出对万古霉素耐药的粪肠球菌;未发现对利奈唑胺、替加环素耐药的肠球菌。(4)屎肠球菌多重耐药现象严重。结论:尿液标本屎肠球菌与粪肠球菌对抗菌药物耐药性差异大,屎肠球菌多重耐药现象形势严峻,已发现耐万古霉素的屎肠球菌,必须严密监控,尽早诊治,切断传播链。     

四联活菌肠溶胶囊治疗36例慢性腹泻临床效果观察

目的 研究证实双歧杆菌、肠球菌、乳杆菌和芽孢杆菌四联活菌肠溶胶囊治疗慢性腹泻的临床效果.方法 选取慢性腹泻患者70例,随机分为两组,治疗组36例,效用四联活菌肠溶胶囊进行治疗,对照组34例,采用诺氟沙星进行治疗,疗程14d.统计观察治疗后两组患者腹泻缓解时间和临床症状的变化以及治疗效果.结果 治疗后第14天治疗组临床症状改善情况与对照组相比有显著性差异;疗程结束时治疗组腹泻缓解率为86.1%(31/34),大便成形率为77.8%(28/36),腹泻伴随症状下降效果明显由于对照组.结论 采用双歧杆菌、肠球菌、乳杆菌和芽孢杆菌四联活菌肠溶胶囊治疗慢性腹泻患者,具有安全有效、无明显不良反应.     

肠球菌属耐药基因检测及耐药性分析

目的 探讨临床分离肠球菌标本的来源分布与耐药性及耐药基因.方法 选取2009年感染患者的肠球菌属分离株,采用常规方法进行菌种鉴定及药物敏感试验,并对其耐药基因进行检测.结果 粪肠球菌检出20株,占57.1％,屎肠球菌共分离到15株,占42.9％;21株多药耐药肠球菌中,阳性基因aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant(6)-Ⅰ、ermB、tetM分别检出19、11、11、19、10株,检出率分别为90.5％、52.4％、52.4％、90.5％、47.6％.结论 临床分离的肠球菌属多药耐药严重;携带抗菌药物相关耐药基因是导致菌株对抗菌药物产生耐药的重要原因.     

耐氨基苷类高水平肠球菌医院感染的危险因素及氨基糖苷类耐药相关基因研究

目的 了解耐氨基糖苷类高水平肠球菌(HLAR)的耐药性和医院感染的危险因素,研究HLAR氨基糖苷类耐药相关基因类型分布.方法 采用全自动微生物鉴定仪VITEK-AMS对857株肠球菌属进行鉴定及抗菌药物敏感性检测;PCR法检测HLAR氨基糖苷类耐药相关基因,并对PCR结果进行测序分析.结果 肠球菌属中HLAR占50.4％,利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁对HLAR的抗菌作用最好,但有3株屎肠球菌对万古霉素和替考拉宁耐药,粪肠球菌对氯霉素和四环素的耐药率高于屎肠球菌,而屎肠球菌对其他常用抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌,粪肠球菌和屎肠球菌的耐药谱明显不同,aac(6')-Ie-aph(2〃)-Ia基因为耐庆大霉素高水平肠球菌(HLGR)的主要耐药基因,占HLGR的88.0％,严重的基础疾病、侵入性操作和头孢三代抗菌药物和激素的应用是肠球菌属医院感染的常见危险因素.结论 HLAR已成为医院感染的重要耐药菌,HLGR产生的主要机制是aac(6')-Ie-aph(2〃)-Ia基因介导对庆大霉素高水平耐药,控制常见医院感染危险因素,合理使用抗菌药物,可减少HLAR医院感染的发生.     

Characterization of an anti-listerial enterocin from wheat silage based Enterococcus faecium

Two Enterococcus faecium and one E. faecalis strains isolated and identified from wheat silage were characterized based on plasmid content, hemolytic activity, antibiotic resistance patterns, bacteriocin production potential, and presence of enterocin structural genes (entA, entB, entP, entL50B). Among the isolates, only the E. faecium U7 strain exhibited bacteriocin activity against Listeria monocytogenes ATCC 7644, and vancomycin resistant Enterococcus spp. (VRE). A combination of three structural genes (entA, entB, and entP) was detected in E. faecium U7. A relationship between the presence of enterocin structural genes, and bacteriocin activity was detected in E. faecium U7; therefore partially purified enterocin (PPE) was further investigated from the isolate. Several bands of different molecular weights were expressed from PPE extracts following tricine SDS‐PAGE analysis. However, the only band showing bacteriocin activity was in an approximate 4‐kDa region. PPE treatment with proteinase K, lysozyme, and α ‐amylase caused complete loss of bacteriocin activity. PPE heat treatment at various temperatures resulted in a notable reduction in bacteriocin expression. Enterocin U7 was relatively heat stable, and presumably exhibits a glucoprotein nature with distinct inhibitory properties. Specific bacterial inhibitory activity of enterocin U7, and the producer strain absence of β ‐hemolysis and vancomycin susceptibility features deserves further investigation to evaluate its potential application in silage inoculation and food preservation. (© 2012 WILEY‐VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim)     

Fatal meningitis caused by vancomycin-resistant enterococci: report of two cases from south India

Vancomycin-resistant enterococci rarely cause meningitis and present a therapeutic challenge. Antimicrobial susceptibility testing was done for strains of Enterococcus species isolated from CSF samples of patients with meningitis by phenotypic methods. Multiplex polymerase chain reaction was performed to determine the genetic basis of vancomycin resistance of such isolates. We report here two cases of enterococcal meningitis caused by vancomycin-resistant Enterococcus species. One of the isolates was identified as Enterococcus faecalis and the other as Enterococcus gallinarum. We also report the simultaneous presence of vanC1 and vanA resistance genes in the strain of E. gallinarum. To the best of our knowledge, this is the first report of vanA resistance gene in an isolate of E. gallinarum from the Indian subcontinent. This is also the first Indian report of vancomycin-resistant Enterococcus causing meningitis.     

2010年中国CHINET肠球菌属细菌耐药性监测

目的了解2010年中国主要地区临床分离肠球菌属细菌对各类抗菌药物的耐药性。方法国内主要地区14所教学医院(12所综合性医院,2所儿童医院)按统一方案、采用统一的材料、方法(K-B法)和判断标准(CLSI 2010年版)进行肠球菌属细菌的耐药性监测。结果共分离到4 046株非重复肠球菌属细菌,最常见菌种为粪肠球菌1 829株(45.2%)、屎肠球菌1 817株(44.9%)、鹑鸡肠球菌78株(1.9%)、鸟肠球菌54株(1.3%)、铅黄肠球菌49株(1.2%)。肠球菌属对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁仍极敏感,耐药率<4%,万古霉素耐药粪肠球菌和屎肠球菌检出率分别为0.6%、3.6%。粪肠球菌对呋喃妥因、磷霉素和氨苄西林耐药率较低,分别为3.2%、5.7%和11.3%,对高浓度庆大霉素耐药率为44.0%;屎肠球菌耐药性明显高于粪肠球菌,对氨苄西林耐药率接近90%,对高浓度庆大霉素耐药率接近70%,对氯霉素耐药率仅为7.3%,儿童屎肠球菌分离株对磷霉素、呋喃妥因耐药率<10%。不同医院分离的肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药率有一定差异。结论屎肠球菌的分离率有增加趋势,肠球菌属细菌对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁依然保持极高的敏感性。     

424株临床分离肠球菌属细菌的耐药性变异

目的探讨肠球菌属临床分离情况与耐药变迁,为指导临床合理用药,控制感染提供依据。方法对广东省东莞中山大学附属东华医院2007--2009年临床送检标本进行常规微生物培养、鉴定和药敏试验,并用WHONET5．4软件统计分析这3年间肠球菌临床分离株在各标本、科室中的分布与耐药性的变迁情况。结果2007--2009年临床分离出肠球菌属细菌424株,其中粪肠球菌338株,占79．7％,屎肠球菌75株,占17．7%,鸟肠球菌11株,占2．6％;肠球菌属在各标本中的分布以尿液为主,占50．2％,其次为伤口分泌物（14．4％）、血液（12．5％）。3年来肠球菌属的菌种和耐药均发生了较大变化,粪肠球菌所占比率每年保持在80％左右,屎肠球菌呈逐年上升趋势,从2007年的13．9%上升至2009年的20．9％,而鸟肠球菌则逐年下降,从4．7％降至0．6％。粪肠球菌对红霉素和四环素的耐药率最高,分别为79．4％～85．7％和84．1％～87．4%,屎肠球菌对氨苄西林、青霉素以及呋喃妥因的耐药率明显高于粪肠球菌,对红霉素、左氧氟沙星、青霉素的耐药率高达80％以上,对呋喃妥因、高浓度的庆大霉素、环丙沙星、四环素、氨苄西林等抗菌药物的耐药率也接近或超过50％。2007年发现1株屎肠球菌对万古霉素耐药。结论肠球菌属耐药性较为严重,不同菌种耐药性有所差异。临床抗感染治疗应以分离菌株的体外抗菌药物敏感性为依据,合理选用抗菌药物,以提高疗效。     

258株肠球菌耐药性分析及耐万古霉素基因检测

目的研究肠球菌的耐药率及耐万古霉素肠球菌(VRE)的耐药表型和基因型。方法按照美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)2009年推荐的微量稀释法进行临床分离肠球菌对各类药物的最小抑菌浓度(MIC)检测,VRE进一步用E-test药敏试验确认;PCR法检测VRE的耐药基因。结果 2010年7月至2011年11月沈阳军区总医院共检出粪肠球菌95株,屎肠球菌163株。粪肠球菌对万古霉素、替考拉宁保持较高敏感度,对氨苄西林、青霉素、呋喃妥因三种抗菌药物敏感度也在65%以上,对其他抗菌药物敏感度低,统计期内未检出耐万古霉素粪肠球菌菌株。屎肠球菌对多数抗菌药物表现为耐药,对氯霉素敏感率为70%,对万古霉素、替考拉宁敏感度下降,为90.7%。期间检出15株VRE,其耐药表型为多重耐药,PCR扩增结果显示,15株万古霉素耐药屎肠球菌VanA基因扩增均为阳性,产物长度在700～1000bp之间,约783bp,符合预期;VanB、VanC引物扩增均阴性。15株万古霉素耐药屎肠球菌对多数抗菌药物耐药,仅对氯霉素、四环素相对敏感,对万古霉素MIC>256mg/L,对替考拉宁也表现为耐药。结论屎肠球菌耐药性高于粪肠球菌,VRE多为多重耐药,给临床治疗带来困难,医院应加强对其预防监测。